CtBP1 and 2 Regulate Endothelial cell identity through interaction with Transcription factor KLF4
- 주제어 (키워드) CtBP , endothelial cell , cell quiescence , EndMT , KLF4 , 내피세포 , 세포 휴지기 , 내피-중간엽 전환
- 발행기관 서강대학교 일반대학원
- 지도교수 주봉건
- 발행년도 2025
- 학위수여년월 2025. 2
- 학위명 석사
- 학과 및 전공 일반대학원 생명과학과
- 실제 URI http://www.dcollection.net/handler/sogang/000000079335
- UCI I804:11029-000000079335
- 본문언어 영어
- 저작권 서강대학교 논문은 저작권 보호를 받습니다.
초록 (요약문)
C-terminal binding proteins (CtBPs), which include two isoforms (CtBP1 and CtBP2), function as NAD+/NADH-dependent transcriptional co-regulators. CtBPs play key roles in cell development, proliferation, survival, migration, cell cycle progression, and apoptosis. Recent studies have suggested that CtBPs contribute to epithelial-to- mesenchymal transition (EMT) and endothelial-to-mesenchymal transition (EndMT). In this study, I explored the roles of CtBPs in differentiated blood vessel endothelial cell identity. This study demonstrates that treatment with MTOB, a dehydrogenase inhibitor of CtBPs, or knockdown of CtBPs using specific siRNAs increased the expression of endothelial cell-specific proteins while reducing the expression of mesenchymal cell- specific proteins. These findings suggest that CtBPs negatively regulate endothelial cell differentiation characteristics. Because differentiated cell identity is closely associated with cell quiescence, I further investigated genes related to cell quiescence. The results reveal that genes involved in the cell cycle, EndMT, and apoptosis were regulated in a CtBPs- dependent manner. Additionally, I found that CtBPs interact with the KLF4 transcription factor to bind to the promoters of certain target genes, such as ADM, THBS1, and SEMA3C, directly repressing their expression. In conclusion, this study uncovers a novel function of CtBPs in regulating endothelial cell identity and EndMT.
more초록 (요약문)
C-terminal binding proteins (CtBPs)는 NAD+/NADH 의존성 전사보조 조절 인자이며 두 개의 동형 (CtBP1, CtBP2)이 존재한다. CtBPs 는 세포 발달, 증식, 생존, 이동, 세포 주기 및 세포 사멸을 조절한다. 최근 CtBPs 는 외피-중간엽 전환(EMT) 및 내피-중간엽 전환 (EndMT) 진행에 기여한다고 알려졌다. 본 연구에서는 분화된 혈관내피세포의 특성과 관련된 CtBPs 의 역할을 탐구하였다. 실험 결과, CtBPs 의 탈수소효소 억제자인 MTOB 처리 또는 CtBPs 특이적 siRNA 처리에 의해 혈관내피세포 특이적 단백질 발현이 증가하고 반면에 중간엽세포 특이적 단백질 발현이 감소하였다. 즉, CtBPs 가 혈관내피세포의 분화 특성을 음성적으로 조절한다는 것을 암시하였다. 분화된 세포 특성은 세포의 휴지기와 밀접하게 연결되어 있어 관련 유전자를 조사하였다. 실험 결과, 세포주기, EndMT, 세포 사멸 유전자 등이 CtBPs 에 의존적으로 조절되었음을 밝혔다. 또한 CtBPs 가 KLF4 전사인자와 결합하여 일부 타겟 유전자 (ADM, THBS1, SEMA3C)의 프로모터에 결합하여 직접적으로 발현을 억제하는 것으로 나타났다. 결론적으로 본 연구에서는 혈관내피세포의 분화된 특성과 EndMT를 조절하는 CtBPs의 새로운 기능을 밝혔다고 판단한다.
more목차
I. Introduction 3
II. Materials and Methods 6
Cell culture 6
RNA isolation and quantitative RT-PCR 6
RNA interference (siRNA) 7
Western blot analysis 7
Immunoprecipitation 8
Chromatin immunoprecipitation (ChIP)8
Statistical analysis 10
III. Results 13
CtBP1 and 2 negatively regulate endothelial cell identity 14
CtBP1 and 2 repress the quiescence of endothelial cells 16
CtBP1 and 2 repress gene expression of KLF4 19
CtBP1 and 2 interact with KLF4 21
Enrichment of CtBP1, CtBP2, KLF4 on promoter of target genes 23
IV. Discussion 24
V. References 28
