Functional Characterization of the Type VI and VII Secretion Systems in Pathogenicity of Vibrio vulnificus
- 주제(키워드) Vibrio vulnificus , Type II secretion system , Type I secretion system
- 발행기관 서강대학교 일반대학원
- 지도교수 김건수
- 발행년도 2012
- 학위수여년월 2012. 2
- 학위명 박사
- 학과 및 전공 일반대학원 생명과학과
- 실제URI http://www.dcollection.net/handler/sogang/000000047302
- 본문언어 한국어
- 저작권 서강대학교 논문은 저작원 보호를 받습니다.
초록/요약
사람에게 기회감염을 일으키는 비브리오 패혈증균의 Type II secretion system (T2SS)를 구성하는 성분 중, EpsC의 기능을 병원성과 관련하여 살펴보았다. epsC가 제거된 돌연변이 균주(epsC mutant)를 동물세포, HEp-2 cell에 처리하였을 때 세포 독성이 감소하였고, 쥐 모델에서도 병원성이 감소하였다. 또한 이 돌연변이 균주에서 세포 밖으로 분비되는 단백질 중 outer membrane proteins, transporters, 그리고 hemolysin (VvhA)와 elastase (VvpE) 단백질의 분비가 감소되는 특징을 보였다. 이러한 단백질 분비 감소는 원래의 epsC 유전자를 넣어줄 경우 다시 wildtype 수준으로 회복되었다. epsC 돌연변이에서 세포 밖으로 분비되지 못한 VvhA와 VvpE 단백질이 주로 periplasmic space에 존재함을 cellular fraction 분석을 통하여 확인할 수 있었다. Type I secretion system (T1SS)의 구성성분인 TolC의 돌연변이 균주는 VvhA와 VvpE의 분비에는 아무런 영향을 주지 않으나 비브리오 패혈증균의 또 다른 독성인자인 RtxA의 분비에 중요한 역할을 함을 확인하였다. 이 연구에서는, 비브리오 패혈증균이 T2SS을 이용하여 VvhA와 VvpE를 분비하는 것이 병원성에 중요한 역할을 한다는 것을 알 수 있었다.
more초록/요약
EpsC, one of the components comprising the type II secretion system (T2SS), was isolated from a human-pathogenic bacterium, Vibrio vulnificus, to evaluate its role in eliciting virulence. An epsC-deleted mutant of V. vulnificus displayed a reduced cytotoxicity to the human cell line HEp-2 and an attenuated virulence in a mouse model. This mutant exhibited dramtic defects in the secretion of diverse extracellular proteins, such as outer membrane proteins, transporters, and the known secreted factors, notably, a hemolysin (VvhA) and an elastase (VvpE). A defect in its secretion of proteins was restored by in trans complementation of the intact epsC gene. Anlyses of cellular fractions revealed that VvhA and VvpE of the ？？epsC mutant were not excreted outside the cell but were present mainly in the periplasmic space. Examination of a V. vulnificus mutant deficient in TolC, a component of the T1SS, showed that it is not involved in the secretion of VvhA and VvpE but that it is necessary for the secretion of another major toxin of V. vulnificus, RtxA. Therfore, the T2SS is required for V. vulnificus pathogenicity, which is mediated by at least two secreted factors, VvhA and VvpE, via facilitating the secretion and exposure of these to host cells.
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