서강대학교

목차

1. 서론 1
1.1. RNA 치료제의 종류 및 발전 배경 1
1.2. 지질 나노입자 (Lipid nanoparticle, LNP) 3
1.3. 지질 나노입자 기반 mRNA 전달 기술의 한계점 6
1.4. 기존 지질 나노입자의 표적화 전략 9
1.5. 연구의 목표 15
2. 결과 및 고찰 16
2.1. 신규 헬퍼 지질 설계 및 합성 16
2.1.1. 신규 헬퍼 지질의 구조 설계 16
2.1.2. 지질 합성 25
2.2. 신규 헬퍼 지질을 이용한 지질 나노입자의 제조 28
2.2.1. 지질 나노입자의 지질 조성 최적화 28
2.2.2. 물리화학적 특성 평가 29
2.2.2.1. 입자 크기, 다분산지수 및 표면 전하 분석 29
2.2.2.2. 산해리상수(pKa) 측정 31
2.2.3. mRNA 봉입 효율 평가 33
2.3. 지질 나노입자의 전달 성능 평가 36
2.3.1. 세포 내 전달 효율 평가 36
2.3.2. 생체 내 전달 효율 평가 39
2.3.3. mRNA의 조직 분포 분석 42
2.3.4. A549 세포 내 전달 효율 평가 45
3. 결론 52
4. 실험 방법 54
4.1. 시약 및 장비 54
4.2. 지질 나노입자의 제조 56
4.3. 지질 나노입자의 물리화학적 특성 분석 57
4.3.1. 입자의 크기, 다분산지수 및 표면 전하 측정 57
4.3.2. 산해리상수(pKa) 측정 58
4.4. 겔 전기영동을 통한 mRNA 봉입 효율 측정 59
4.5. 세포 실험 60
4.5.1. 루시퍼레이즈 분석 60
4.5.2. 유세포 분석 61
4.6. 동물 실험 61
4.6.1. 생체 내 mRNA 발현 평가 62
4.6.2. mRNA의 조직 분포 평가 62
4.7. 지질 합성 64
5. 참고문헌 98