The role of Muc4 in tumor-infiltrating Treg cell
- 주제어 (키워드) Tumor infiltrating regulatory T cell , MUC4 , Anti-tumor immunity , 종양 침윤 조절 T 세포 , MUC4 , 항암 면역 반응
- 발행기관 서강대학교 일반대학원
- 지도교수 이갑열
- 발행년도 2025
- 학위수여년월 2025. 2
- 학위명 석사
- 학과 및 전공 일반대학원 생명과학과
- 실제 URI http://www.dcollection.net/handler/sogang/000000079660
- UCI I804:11029-000000079660
- 본문언어 영어
- 저작권 서강대학교 논문은 저작권 보호를 받습니다.
초록 (요약문)
The tumor microenvironment is formed through intricate interactions among diverse cells within tumors, which plays a critical role in regulating anti-tumor immune responses. Regulatory T cells (Tregs) are pivotal in mediating the suppression of anti-tumor immune responses within the tumor microenvironment. Tumor-infiltrating regulatory T cells exhibit distinct characteristics compared to conventional Tregs, particularly through the increased expression of certain factors linked to immunosuppressive functions and other functional aspects of Tregs. However, the specific role of MUC4, which is highly expressed in tumor-infiltrating Tregs, remains unclear. This study demonstrates that regulatory T cells with reduced Muc4 expression exhibit a diminished ability to suppress CD4+ T cell proliferation. Furthermore, Muc4 knockout (KO) mice exhibited delayed tumor progression in a manner dependent on tumor type, although no significant differences in immune suppression or Treg marker expression were observed via flow cytometry analysis. In a model using adoptive T cell transfer to specifically deplete MUC4 in Tregs, tumor progression was further delayed, and Ki67 expression was reduced in tumor-infiltrating Tregs. These results suggest that MUC4 deficiency in tumor-infiltrating Tregs inhibits tumor progression and plays a crucial role in regulating the proliferative capacity of Tregs.
more초록 (요약문)
종양은 다양한 세포들이 복잡한 상호작용을 통해 종양 미세환경을 이루는데, 이는 항암 면역 반응을 조절하는 데 중요한 영향을 미친다. 그 중 조절 T 세포는 종양 미세환경에서 항암 면역 반응을 억제하는데 중요한 역할을 한다. 종양에 침윤된 조절 T 세포는 일반적인 조절 T 세포와 달리 특정 인자들이 높게 발현되며, 이 인자들이 면역 억제 및 조절 T 세포의 다른 기능에 기여하는 것으로 알려져 있다. 그러나 종양 침윤 조절 T 세포에서 높게 발현되는 MUC4의 기능은 아직 명확히 규명되지 않았다. 본 연구에서는 MUC4의 발현이 저하된 조절 T 세포는 CD4 T 세포에 대한 증식 억제 능력이 감소하였다. Muc4 KO 쥐는 종양의 종류에 따라 종양의 진행이 느려졌으나, flow cytometry 분석에서는 면역 억제 및 조절 T 세포의 마커의 발현에 차이가 확인되지 않았다. 입양 T 세포 이식을 통해 조절 T 세포에만 MUC4을 결핍시킨 모델에서는 종양의 진행이 느려지고, 종양 침윤 조절 T 세포에서 Ki67의 발현이 감소하였다. 결과적으로 종양 침윤 조절 T 세포에서 MUC4의 결핍이 종양의 진행을 억제하며 억제를 일으키는 원인 중 하나로 조절 T 세포의 증식과 연관이 있음을 시사한다.
more목차
Introduction 7
Materials and Methods 10
Mice 10
Cell lines 10
Isolation of splenic nave CD4+ T cells and In vitro differentiation into T cell subsets 11
Isolation of tdLN Treg cell 12
Retroviral(RV) Transduction and in vitro Suppression assay 13
in vivo tumor models 14
Adoptive T cell transfer 15
Cell surface marker staining, intracellular cytokine / transcription factor 15
staining and Flow cytometry analysis 15
Cell lysate preparation and Westernblot analysis 16
Immunohistochemistry (IHC) analysis 17
RNA isolation and qRT-PCR 18
Single-Cell RNA Sequencing (scc-RNA-seq) Data Analysis 18
Statistical analysis 19
Results 20
Muc4 is up-regulated in tumor infiltrating regulatory T cell 20
Knockdown of Muc4 reduces the immunosuppressive function of Treg cells 26
Characterization of Muc4 knockout mice 29
Heterogenous tumor growth responses linked to Muc4 deficiency in distinct experimental models 37
Muc4 Deficiency in Treg Reduces Tumor Growth and Affects TIL composition in Rag2-/- Mice Bearing MC38 Tumors 49
Discussion 54
References 58
