세포 내 칼슘에 의한 Cav3.3 칼슘 채널의 특성 조절 연구
- 발행기관 서강대학교 일반대학원
- 지도교수 이정하
- 발행년도 2017
- 학위수여년월 2017. 2
- 학위명 석사
- 학과 및 전공 일반대학원 생명과학과
- 실제URI http://www.dcollection.net/handler/sogang/000000061137
- 본문언어 한국어
- 저작권 서강대학교 논문은 저작권보호를 받습니다.
초록/요약
칼슘 의존적 비활성화 (calcium-dependent inactivation, CDI)는 세포질 칼슘 농도 증가가 전위활성화 칼슘채널을 통한 칼슘 이온의 유입을 감소시키는 현상을 말한다. 칼슘 의존적 비활성화는 고전위 활성화 채널들을 포함한 몇 가지 이온통로에서 발견되었으며, 칼모듈린 (calmodulin, CaM)이 이 현상을 중재하는 것으로 밝혀진 바 있다. 본 연구에서는 T-형 채널 아형인 Cav3.2와 Cav3.3 채널에서 칼슘 의존적 비활성화가 일어나는 지를 파악하기 위하여 각각의 채널이 안정화 발현된 HEK293 세포의 내부 칼슘 농도를 27 nM 또는 1 μM로 조정한 후, patch clamping 방법으로 전류를 측정하였다. Cav3.2 아형에서는 세포 내부 칼슘농도 변화에 따른 전기생리학적 특성의 변화가 뚜렷하게 보이지 않았다. 반면에 Cav3.3 칼슘채널은 세포 내부 칼슘농도가 27 nM에서 1 μM로 증가함에 따라 채널의 활성화와 비활성화 키네틱스가 빨라졌으며, 활성화 및 비활성화 커브들이 음 방향으로 이동되었다. 이 결과들은 Cav3.3 채널에서 뚜렷하게 칼슘 의존적 비활성화가 일어남을 제시한다. 그러나 Cav3.3 채널이 안정화 발현된 HEK293 세포주에 칼모듈린의 우성 음성 돌연변이체 (dominant negative mutant)인 CaM1234를 과발현 하였을 경우, 내부 칼슘 증가에 의해 나타났던 칼슘 의존적 비활성화 특성들이 줄어들었다. 이 결과들은 Cav3.3 채널의 칼슘 의존적 전류 비활성화에 칼모듈린이 관여함을 의미한다. 추후 Cav3.3 채널과 칼모듈린과의 상호 작용을 밝히기 위해 면역침강법 (immunoprecipitation, IP) 이나 효모 이중 보합법 (yeast two-hybrid method)과 같은 생화학적 실험이 진행돼야 할 것이다.
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