Functional Characterization of EWS-Oct-4 oncogene
- 발행기관 서강대학교 대학원
- 지도교수 김정호
- 발행년도 2007
- 학위수여년월 200702
- 학위명 석사
- 학과 및 전공 생명과학
- 식별자(기타) 000000103507
- 본문언어 영어
초록/요약
In most Bone and Soft tissue tumors, tumor-specific chromosomal translocation was found in common. Especially, EWS (Ewing’s sarcoma gene)-related chromosomal translocation cases were well known. One of them, EWS-Oct-4, which was recently first identified (Yamaguchi et al., 2005), was generated as a result of fusing N-terminal transactivation domain of EWS to partial N-terminal domain, POU domain, and C-terminal domain of Oct-4, which was well identified as a transcription factor of embryonic stem cell. Using various kinds of molecular and biochemical methods, I tried to identify the role of EWS-Oct-4 on transformation and tumorigenesis. Because this fusion gene had almost the same structure with Oct-4 except N-terminal transactivation domain of EWS, Oct-4 was used as a control group. As a result, I found that EWS-Oct-4 could bind to the specific nucleotide sequence, opn-1 which was the part of downstream target gene of Oct-4, same as Oct-4 could do. I also examined subcellular localization of EWS-Oct-4, and found that this chimeric protein was specifically localized in nucleus, just as Oct-4. Actually I examined activity of transactivation of EWS-Oct-4, and confirmed a strong transactivation activity, which was given mainly from transactivation domain of EWS N-Terminal, POU DNA binding domain, and partially from cell line-specific transactiviation domain of Oct-4 C-Terminal domain. Consequently, EWS-Oct-4 was an oncogene candidate that could strongly activate transcription of a specific downstream target gene in nucleus, and transform the cells.
more초록/요약
골 및 육아종양에서는 공통적으로 종양특이적인 염색체 전좌(chromosomal translocation)가 일어난다. 이 중에서도 EWS (Ewing’s sarcoma gene) 유전자와의 다양한 융합유전자 형성이 잘 알려져 있는데, 최근 밝혀진 형태로는 EWS-Oct-4 융합유전자가 있다 (Yamaguchi et al., 2005). EWS-Oct-4의 경우, EWS의 N-말단 활성 도메인의 일부와 배아 줄기 세포의 전사인자로 알려진 Oct-4의 N말단 도메인 일부, POU 도메인과 C-말단 도메인과의 융합유전자 형성으로 인하여 생성되는 것으로 밝혀졌다. 이렇게 형성된 EWS-Oct-4가 암 형성에 어떠한 역할을 할 수 있는지에 대해서 여러 분자생물학적, 생화학적 기법을 사용하여 규명하고자 하였다. 이 융합유전자의 경우, 전사 활성 도메인(transactivation domain)을 제외하고 Oct-4와 거의 유사한 구조를 가지고 있어, Oct-4를 대조군으로 사용하였다. 그 결과, EWS-Oct-4가 Oct-4 하위 유전자 (downstream target gene)의 특정 염기서열에 Oct-4와 거의 비슷한 정도로 결합할 수 있는 능력이 있음을 밝혀냈다. DNA에 강한 결합능력을 갖는 EWS-Oct-4의 세포 내 위치를 확인한 결과, 핵 내에 존재함을 확인할 수 있었다. 또한 EWS-Oct-4의 전사 활성을 확인한 결과, 강력한 전사활성능력을 갖고 있음을 알 수 있었으며, 그러한 활성 능력은 특히 EWS에서 유래한 활성도메인과 DNA와의 결합에 관여하는 Oct-4의 POU 도메인에 의해 크게 영향을 받으며, Oct-4의 C-말단 도메인에 의해 세포주 특이적으로 어느 정도의 영향을 받는 것으로 나타났다. 이러한 결과들을 종합해 볼 때, EWS-Oct-4는 핵 내에 존재하면서, 특정 하위 유전자의 전사를 크게 활성화 시켜, 결국 세포를 형질전환 시킬 수 있는 발암유전자로 예상된다.
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